Tests sérologiques
Détection des propriétés antigéniques de la particule virale
La capside des virus est constituée d’une ou de plusieurs protéines structurales. Ces molécules, exposées au milieu extérieur, présentent des propriétés antigéniques pouvant être exploitées pour l’élaboration d’outils de détection sérologique. De nombreux anticorps monoclonaux ou polyclonaux dirigés contre le PVY peuvent être produits après immunisation de lapins, de souris ou de rats. Les protocoles d’immunisation sont réalisés à partir de suspensions de virus purifiés ou des peptides de synthèse (mimant des épitopes de surface, linéaires ou conformationnels, de la capside). Les caractéristiques des anticorps ainsi produits (spécificité et affinité) permettent de développer plusieurs types de tests dont le test ELISA (Enzyme Linked ImmunoSorbent Assay), outil le plus fréquemment utilisé pour la détection sérologique d’entités virales. Compte tenu de la variabilité des isolats des différents groupes et variants du PVY, les sérums disponibles contre ce virus permettent la détection globale de tous les isolats viraux (sérum polyclonal), spécifique des isolats des groupes PVYO (sérum monoclonal) ou spécifique des isolats du groupe PVYN (sérum monoclonal). Les caractéristiques moléculaires des gènes codant la protéine de capside du PVY conditionnent la reconnaissance spécifique des isolats. Ainsi, la détection des variants PVYNTN et PVYN-W est assurée par un sérum dirigé respectivement contre les isolats du groupe PVYN et ceux du groupe PVYO. Plusieurs tentatives ont été entreprises pour produire un sérum spécifique des variants du PVY. Aucune d’entre elles n’ayant abouti à ce jour, cet objectif reste un enjeu majeur dans le développement d’outils sérologiques dirigés contre le PVY. Le test ELISA repose sur l’utilisation de deux (Double Antibody Sandwich, DAS) ou de trois (Triple Antibody Sandwich, TAS) anticorps d’origine et de spécificité différentes pour mettre en évidence la présence d’une molécule antigénique dans un échantillon à tester.
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Rédaction :
Emmanuel Jacquot
Date de création : 04 Octobre 2007 Mise à jour : 24 Octobre 2007 |